|
|
Novel Reactive Groups for Modification DNA by Oxoosmium Complexes
Havran, Luděk ; Vidláková, Pavlína ; Špaček, Jan ; Hermanová, Monika ; Fojta, Miroslav
DNA is naturally electroactive moleclue producing several intrinsie voltammetric signals. Some of them found appliction in electrochemical analysis of DNA interactions and damage. In particular types of applictaions is a suitable use DNA labelling by redox active tags to increase selectivity and sensitivity of analysis.One type of long-term used tags are complexes of osmium tetroxide with nittrogen ligunds (Os,L). These complexes preferentially react with pyrimidines in single stand DNA producing electractive adducts. primary reaction site for Os,L is C-C double bond in pyrimidine nucleobases. In this contribution will be presented results acquired with DNA containing chemically modified nuclebase.
|
|
|
Electrochemical Study of Osmium Tetroxide Comptests Reactivity to DNA Bearing Butylacrylate
Havran, Luděk ; Havranová-Vidláková, Pavlína ; Špaček, Jan ; Vítová, Lada ; Hermanová, Monika ; Fojta, Miroslav
Coniplexes of osmium tetroside with nitrogen ligands (Os,L e.g.. with 2,2'-bipyridine (bpy) find application in redox labelling of DNA.. probing of DNA structure, and in studies of DNA interaction with other molecules Os,L preferentially react with pyrimidines in single strand DNA producing electroactive adducts Primary reaction site for Os,L is C=C double bond in pyrimidine nucleobases. In this contribution we introduce a new two-step technique of DNA modification with Os,bpy, consisting in enzymatic construdion or DNA beating butyl acrylate (BA) moieties attached to uracil or T-deaza adenine, followed by chemical modification of a reactive C=C double bond in BA residue.
|
|
|
Redox značení DNA - od jednoduché detekce DNA pomocí modifikace komplexy oxidu osmičelého k ratiometrické analýze sekvencí
Havran, Luděk ; Balintová, Jana ; Vidláková, Pavlína ; Macíčková-Cahová, Hana ; Pivoňková, Hana ; Hocek, Michal ; Fojta, Miroslav
Elektrochemické metody našly široké uplatnění jak v analýze DNA a studiu jejích interakcí s různými látkami, tak i při vývoji senzorů pro detekci hybridizace DNA. DNA je přirozeně elektroaktivní molekula, která poskytuje na různých typech pracovních elektrod řadu analyticky využitelných elektrochemických signálů. Pro některé typy analýz, zvláště pak při vývoji DNA hybridizačních senzorů, se osvědčilo užití redox aktivních značek. Jedním ze způsobů jak zavést do DNA elektroaktivní značku je její modifikace pomocí komplex oxidu osmičelého s dusíkatými ligandy (Os,L). Vznikající adukty poskytují na rtuťových i uhlíkových elektrodách elektrochemické signály v důsledku redukce/oxidace atomu osmia v molekule aduktu. Tato metoda značení DNA našla uplatnění ve vysoce citlivé analýze DNA a také v analýze nukleotidových sekvencí. Další z metod pro přípravu redox značené DNA je enzymatická inkorporace značených deoxyribonukleotid trifosfátů (dNTP) pomocí DNA polymeráz. Značené dNTP lze připravit jednoduchou cross-coupling reakcí ve vodném prostředí. V tomto příspěvku bude demonstrována aplikace různých redox aktivních značek v elektrochemické analýze DNA.
|
host ::
RSS.